Fenilgalaktosida, juga dikenal sebagai p-nitrofenil β-D-galaktopiranosida (pNPG), adalah substrat sintetik yang sering digunakan dalam eksperimen biokimia dan biologi molekuler.Ini biasanya digunakan untuk mendeteksi dan mengukur aktivitas enzim β-galaktosidase.
Ketika fenilgalaktosida dihidrolisis oleh β-galaktosidase, ia melepaskan p-nitrofenol, yang merupakan senyawa berwarna kuning.Pembebasan p-nitrofenol dapat diukur secara kuantitatif menggunakan spektrofotometer, karena serapan p-nitrofenol dapat dideteksi pada panjang gelombang 405 nm.