Fenilgalaktosida CAS:2818-58-8

Efek pada aktivitas enzim: Fenilgalaktosida umumnya digunakan untuk mengukur aktivitas enzim β-galaktosidase.Ketika fenilgalaktosida dihidrolisis oleh β-galaktosidase, ia melepaskan p-nitrofenol.Akumulasi p-nitrofenol dapat diukur secara kuantitatif, memberikan wawasan tentang aktivitas β-galaktosidase.Efek ini dimanfaatkan dalam aplikasi seperti pengujian enzim dan sistem penyaringan.

Analisis ekspresi gen: Fenilgalaktosida sering digunakan sebagai substrat dalam eksperimen biologi molekuler untuk mempelajari ekspresi gen.Gen lacZ, yang mengkode β-galaktosidase, biasanya menyatu dengan rangkaian pengatur gen lain yang diinginkan.Ekspresi gen lacZ dan hidrolisis fenilgalaktosida oleh β-galaktosidase dapat menunjukkan pola ekspresi dan level gen target yang diteliti.

Sistem skrining: Fenilgalaktosida merupakan komponen penting dari sistem skrining yang memanfaatkan aktivitas β-galaktosidase.Salah satu contoh yang dikenal luas adalah metode penyaringan biru-putih, yang digunakan untuk mengidentifikasi sel rekombinan atau sel yang ditransformasi dalam eksperimen biologi molekuler.Koloni yang berhasil mengambil DNA rekombinan atau mengalami rekombinasi genetik akan mengekspresikan β-galaktosidase, yang menyebabkan hidrolisis fenilgalaktosida dan terbentuknya warna biru.

Pemurnian protein: Dalam beberapa kasus, fenilgalaktosida dapat digunakan sebagai ligan untuk kromatografi afinitas guna memurnikan protein yang secara spesifik mengikat atau diaktifkan oleh β-galaktosidase.Protein yang diinginkan mungkin memiliki tag afinitas atau tag fusi yang mengandung domain pengikat β-galaktosidase.Dengan melewatkan campuran protein melalui kolom dengan fenilgalaktosida yang diimobilisasi, protein yang diinginkan dapat ditahan secara selektif dan kemudian dielusi.