4-Nitrofenil beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Efek: ONPG merupakan substrat yang khusus digunakan untuk mendeteksi keberadaan dan aktivitas enzim β-galaktosidase.Ketika enzim β-galaktosidase ada dan aktif, ia memecah ONPG menjadi dua produk: o-nitrofenol dan turunan galaktosa.Pembebasan o-nitrofenol menghasilkan perubahan warna kuning yang dapat diukur dengan menggunakan spektrofotometer.

Aplikasi: ONPG memiliki beberapa aplikasi dalam penelitian biologi molekuler dan biokimia:

Penentuan aktivitas β-galaktosidase: ONPG umumnya digunakan untuk mengukur dan mengukur aktivitas enzim β-galaktosidase.Laju pembentukan o-nitrofenol yang berbanding lurus dengan aktivitas enzim dapat diukur secara spektrofotometri.

Ekspresi dan regulasi gen: ONPG sering digunakan dalam eksperimen yang berkaitan dengan studi ekspresi dan regulasi gen.Ini sering digunakan dalam pengujian protein fusi, seperti sistem fusi lacZ yang umum digunakan, untuk mempelajari ekspresi gen di bawah kendali promotor tertentu.Aktivitas beta-galaktosidase yang diukur menggunakan ONPG memberikan wawasan tentang tingkat ekspresi gen.

Skrining aktivitas β-galaktosidase: ONPG dapat digunakan sebagai metode skrining kolorimetri dalam teknologi DNA rekombinan untuk mengidentifikasi keberadaan dan fungsi gen LacZ, yang mengkode β-galaktosidase.Metode penyaringan ini membantu dalam mengidentifikasi klon yang mengandung gen yang diinginkan.

Studi kinetika enzim: ONPG juga berguna dalam mempelajari kinetika enzim β-galaktosidase.Dengan mengukur laju reaksi enzim-substrat pada konsentrasi substrat yang berbeda, parameter kinetik seperti konstanta Michaelis-Menten (Km) dan laju reaksi maksimum (Vmax) dapat ditentukan.